MicroRNA 21 (MIR21)核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

摘要：

本发明为一种microRNA 21 (MIR21)核酸定量检测试剂盒（PCR‑荧光探针法）。通过RT‑PCR的方法，将样品中的RNA逆转录得到相应的cDNA，再利用特定的引物和探针，结合实时荧光定量PCR检测技术，可以准确检测样本中microRNA 21 (MIR21)的表达量。此种检测方法可以对食管癌患者的外周血血清样本中的microRNA 21 (MIR21)进行定量分析，临床上可以用以辅助诊断和评价预后的治疗效果。本发明通过分子学上的医学检测手段来指导临床治疗，具有一定的临床价值。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201711343778.2

申请日期：2017-12-15

公开/公告号：CN109929921A

公开/公告日：2019-06-25

主分类号：C12Q1/686(2018.01)

申请/专利权人:安徽普元生物科技股份有限公司

发明/设计人:不公告发明人

主申请人地址:230088 安徽省合肥市高新区燕子河路58号

权利要求：

1.本发明为一种microRNA 21 (MIR21)核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法），含有4种组分，分别为：一步法RT-PCR反应液（360μL/管），阳性对照品（50μL/管）、阴性对照品（50μL/管）、2×106copies/µl标准品（20μL/管）主要成份组成； （1）一步法RT-PCR反应液中含有DEPC处理的水、逆转录酶、Taq酶、dNTPs、RT-PCR缓冲液、寡聚（dT）15-18、MgCL2（3mM）、检测用上游引物（0.2μM）、检测用下游引物（0.2μM）、荧光探针（0.3μM）； （2）本发明的试剂含有特异的引物、探针序列，以及标准品序列： 检测用上游引物序列为：5’—TGTCGGGTAGCTTATCAG—3’ 检测用下游引物序列为：5’—TGTCAGACAGCCCATCGACTG—3’ 荧光探针序列：5’—FAM—GTTGCCATGAGATTCAACAG—TAMRA—3’ （3）质控品分为阳性对照品和阴性对照品，阳性对照品为有microRNA 21 (MIR21)的RNA样品，阴性对照品为无microRNA 21 (MIR21)的RNA样品； （4）2×106copies/µl标准品为含有标准扩增序列的质粒，标准品序列为：TGTCGGGTAGCTTATCAGACTGATGTTGACTGTTGAATCTCATGGCAACACCAGTCGATGGGCTGTCTGACA。 2.根据权利要求1所述的microRNA 21 (MIR21)核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法），其特征是：本发明试剂盒规格为10人份/盒；每盒中各组分的量为：一步法RT-PCR反应液（360μL/管），阳性对照品（50μL/管）、阴性对照品（50μL/管）、2×106copies/µl标准品（20μL/管）。