一种以石墨烯/氧化钛复合多孔微球为载体的固定化α‑淀粉酶的制备方法

摘要：

本发明公开了一种以石墨烯/氧化钛复合多孔微球为载体的固定化α‑淀粉酶的制备方法，具体包括以下步骤：首先制备石墨烯/氧化钛复合多孔微球；然后制备α‑淀粉酶溶液，将上述制得的石墨烯/氧化钛复合多孔微球和α‑淀粉酶溶液混合搅拌1‑2h，然后300W功率下超声处理1‑4h，过滤，得到的固体采用柠檬酸和柠檬酸钠组成的缓冲溶液洗涤，干燥，得到固定化α‑淀粉酶。本发明制得的固定化α‑淀粉酶酶失活小，重复使用性能优异，热稳定性好。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710637893.4

申请日期：2017-07-31

公开/公告号：CN107287183A

公开/公告日：2017-10-24

主分类号：C12N11/14(2006.01)I

申请/专利权人:东莞市联洲知识产权运营管理有限公司

发明/设计人:陈东进

主申请人地址:523000 广东省东莞市松山湖高新技术产业工发区生产力大厦406

专利代理机构:北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246

代理人:连平

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种以石墨烯/氧化钛复合多孔微球为载体的固定化α‑淀粉酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将氧化石墨烯和去离子水混合搅拌均匀后500W功率下超声处理1‑5h，得到氧化石墨烯溶液；(2)利用注射器将上述氧化石墨烯溶液逐滴加入到由低温冷冻浴控温的接收液中，然后依次经过冷冻干燥、100℃下真空干燥，得到氧化石墨烯多孔球；(3)将环己烷、无水乙醇混合搅拌均匀后加入油酸，搅拌30min后，向混合溶液中滴入钛酸四丁酯、三乙胺，继续搅拌30min，然后加入上述制得的氧化石墨烯多孔球，搅拌混合后转移至反应釜中，150‑180℃下反应10‑20h，反应结束后冷却至室温，过滤，制得的固体依次用去离子水、无水乙醇洗涤，干燥，得到的固体加入到交联剂溶液中，55‑75℃下水浴处理1‑5h，然后在液相还原剂中处理，得到石墨烯/氧化钛复合多孔微球；(4)制备α‑淀粉酶溶液，将上述制得的石墨烯/氧化钛复合多孔微球和α‑淀粉酶溶液混合搅拌1‑2h，然后300W功率下超声处理1‑4h，过滤，得到的固体采用柠檬酸和柠檬酸钠组成的缓冲溶液洗涤，干燥，得到固定化α‑淀粉酶。