CRISPER‑Cas9系统介导的山羊EDAR基因敲除的方法

摘要：

本发明利用CRISPER‑Cas9系统介导完成山羊EDAR基因敲除的方法，其是依据山羊的<i>EDAR</i>基因序列，构建基于CRISPER‑Cas9系统的两个gRNA表达载体，然后将优化后的CRISPER‑Cas9载体和构建的gRNA表达载体共同转入山羊的胎儿成纤维细胞中，获得山羊EDAR基因敲除的细胞。本发明构建的CRISPER‑Cas9介导的打靶载体为山羊<i>EDAR</i>基因的敲除提供了一种简单快捷安全的途径。该方法在细胞系筛选过程中没有涉及任何筛选标记基因，从而大大提高了转基因动物的安全性，对山羊的遗传育种以及基因功能研究具有重要价值。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710437991.3

申请日期：2017-06-12

公开/公告号：CN106978445A

公开/公告日：2017-07-25

主分类号：C12N15/90(2006.01)I

申请/专利权人:内蒙古大学

发明/设计人:刘东军;郝斐;闫玮

主申请人地址:010021 内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西路235号

国别省市代码:内蒙古;15

权利要求：

CRISPER‑Cas9系统介导的山羊EDAR基因敲除的方法，其特征在于，其是根据山羊的EDAR基因序列，构建基于CRISPER‑Cas9系统的两个gRNA表达载体，然后将优化后的CRISPER‑Cas9载体和上述构建的两个gRNA表达载体共同转入山羊的胎儿成纤维细胞中，获得山羊EDAR基因敲除的细胞系。