一种中草药的抗病毒功能的检测方法

摘要：

本发明公开了一种中草药的抗病毒功能的检测方法，步骤是：一、样品处理：(1)、中草药预处理：将选择的中草药产品，如果是固体或制剂，进行标准熬煮成为液体汤药；如果是液体产品，直接进行1500rpm离心5min,去除沉淀；(2)、用0.45μm滤器过滤上述过程得到的上清液为样品，放‑20℃冰箱中保存；二、样品最佳浓度的选择：(1)、设置不同浓度梯度50％(即250ul完全培养基+250ul中草药样品)、10％、1％、0.1％，28℃孵育EPC细胞24h；(2)、观察EPC细胞的存活情况，选择合适浓度；三、抗病毒功能检测；本发明提供的中草药具有明显的抗病毒效果，不但能够提高养殖生物的免疫力，提高对外界环境的抗逆性，还具有无毒、无药物残留、使用安全方便的优点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710237113.7

申请日期：2017-04-12

公开/公告号：CN106995835A

公开/公告日：2017-08-01

主分类号：C12Q1/18(2006.01)I

申请/专利权人:青岛农业大学

发明/设计人:王文琪;徐申波;陈师勇;李建;王鑫

主申请人地址:266109 山东省青岛市城阳区长城路700号

专利代理机构:北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350

代理人:汤东凤

国别省市代码:山东;37

权利要求：

一种中草药的抗病毒功能的检测方法，其特征在于：步骤如下：一、样品处理(1)、中草药预处理：将选择的中草药产品，如果是固体或制剂，进行标准熬煮成为液体汤药；如果是液体产品，直接进行1500rpm离心5min,去除沉淀；(2)、用0.45μm滤器过滤上述过程得到的上清液为样品，放‑20℃冰箱中保存；二、样品最佳浓度的选择(1)、设置不同浓度梯度50％(即250ul完全培养基+250ul中草药样品)、10％、1％、0.1％，28℃孵育EPC细胞24h；(2)、观察EPC细胞的存活情况，选择合适浓度；三、抗病毒功能检测(1)、实验前先用选择好的样品浓度孵育EPC细胞24h，并设立不加中草药样品和用EPC中草药样品的对照组；(2)、所有孔吸出原培养基用0.1moiSVCV孵育细胞1h后，吸出培养基再用10％FBS+MEM培养基孵育细胞，观察24h时细胞的病变情况并收集样品；(3)、提取上述样品RNA，反转录为cDNA，分别检测与抗病毒反应相关的MX1的转录水平以及SVCV‑G的复制水平。