一种使用多内参基因组合研究牦牛胚胎基因的方法

摘要：

本发明提供一种使用多内参基因组合研究牦牛胚胎基因的方法，包括以下步骤：（1）提取牦牛胚胎组织的总RNA，反转录为cDNA；（2）使用多个内参基因，分别设计特异性引物进行实时荧光定量PCR反应，得到Ct值；（3）根据步骤（2）获得的Ct值，用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件筛选出最稳定的内参基因组合；（4）将步骤（3）获得的内参基因组合和目的基因一起进行qRT‑PCR反应，计算目的基因在各组织中的相对表达量。应用本发明的方法从多个内参基因中筛选出牦牛胚胎各组织中表达最稳定的内参基因，弥补了单一内参基因的不足，对推动牦牛生物技术研究方法的改进具有重要意义。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710054519.1

申请日期：2017-01-24

公开/公告号：CN106591477A

公开/公告日：2017-04-26

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

发明/设计人:吴晓云;褚敏;丁学智;梁春年;郭宪;王宏博;裴杰;包鹏甲;阎萍

主申请人地址:730000 甘肃省兰州市七里河区小西湖硷沟沿335号

专利代理机构:北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249

代理人:吕玉博

国别省市代码:甘肃;62

权利要求：

一种使用多内参基因组合研究牦牛胚胎基因的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）提取牦牛胚胎组织的总RNA，反转录为cDNA；（2）使用多个内参基因，分别设计特异性引物进行实时荧光定量PCR反应，得到Ct值；（3）根据步骤（2）获得的Ct值，用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件筛选出最稳定的内参基因组合；（4）将步骤（3）获得的内参基因组合和目的基因一起进行qRT‑PCR反应，计算目的基因在各组织中的相对表达量。