一种3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的制备方法及其制备用酶

摘要：

本发明涉及一种利用生物酶催化技术制备3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的方法及其制备用7α‑类固醇脱氢酶。该方法以鹅去氧胆酸为底物，在NAD、乳酸脱氢酶、丙酮酸钠以及缓冲溶液存在的条件下，用7α‑类固醇脱氢酶催化鹅去氧胆酸制备3α‑羟基‑7氧代‑5β胆烷酸，其中7α‑类固醇脱氢酶来源于羊种布鲁氏菌<i>Brucella </i><i>melitensis</i>。该方法操作简单、反应条件温和易控、反应时间短、对底物的转化率高达99.8%以上，所获得的产品的含量在96.8%以上。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710012365.X

申请日期：2017-01-09

公开/公告号：CN106609292A

公开/公告日：2017-05-03

主分类号：C12P33/02(2006.01)I

申请/专利权人:眉山市新功生物科技有限公司%邦泰生物工程（深圳）有限公司

发明/设计人:傅荣昭;刘立辉;曹磊;刘滔滔

主申请人地址:620031 四川省眉山市东坡区金象化工产业园区

国别省市代码:四川;51

权利要求：

一种3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的制备方法，其特征在于：以鹅去氧胆酸为底物，在NAD、乳酸脱氢酶、丙酮酸钠以及缓冲溶液存在的条件下，用7α‑类固醇脱氢酶催化鹅去氧胆酸制备3α‑羟基‑7氧代‑5β胆烷酸，所述7α‑类固醇脱氢酶来源于羊种布鲁氏菌<i>Brucella </i><i>melitensis</i>，所述乳酸脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，在整个催化反应体系中，所述底物的浓度为50～100mg/mL，所述NAD的浓度为0.01～0.25mg/mL，所述丙酮酸钠的浓度为10～30mg/mL。