一种H5亚型禽流感病毒的增殖方法

摘要：

本发明提供一种H5亚型禽流感病毒的增殖方法，是取H5亚型禽流感病毒用病毒稀释液进行稀释后接种10日龄的SPF鸡胚，在36℃培养，然后收获72h未死亡鸡胚的尿囊液，收集尿囊液，置‑40℃保存；收集的尿囊液再用病毒稀释液进行10倍倍比稀释，选取10^‑6～10^‑9范围稀释度的病毒液接种10日龄SPF鸡胚，置35.5℃培养，收获72h未死亡胚尿囊液，再取高稀释度且HA效价最高的尿囊液混合后作为种子液；收集的种子液连续传代，再取高稀释度且HA效价为10log2、9log2、10log2的尿囊液混合，获得最终制备疫苗用的病毒液。本发明的方法能够节约疫苗制备成本，提高生产效率，从而克服现有制苗用毒株病毒含量比较低，制备多联多价疫苗需要浓缩才能达到单苗的技术缺陷。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201611170075.X

申请日期：2016-12-16

公开/公告号：CN106754750A

公开/公告日：2017-05-31

主分类号：C12N7/00(2006.01)I

申请/专利权人:青岛易邦生物工程有限公司

发明/设计人:宫晓;孙健;徐保娟;李陆梅;郭伟伟;朱艳梅;胡潇

主申请人地址:266009 山东省青岛市红岛经济开发区岙东南路21号

专利代理机构:北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350

代理人:汤东凤

国别省市代码:山东;37

权利要求：

一种H5亚型禽流感病毒的增殖方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)取H5亚型禽流感病毒用病毒稀释液进行稀释后接种10日龄的SPF鸡胚，在36℃培养，然后收获72h未死亡鸡胚的尿囊液，收集尿囊液，置‑40℃保存；2)将步骤1)收集的尿囊液再用病毒稀释液进行10倍倍比稀释，选取10^‑6～10^‑9范围稀释度的病毒液接种10日龄SPF鸡胚，置35.5℃培养，收获72h未死亡胚尿囊液，再取高稀释度且HA效价最高的尿囊液混合后作为种子液。3)按照步骤3)的方法对步骤2)收集的种子液连续传代4次，再取高稀释度且HA效价为10log2、9log2、10log2的尿囊液混合，获得最终制备疫苗用的病毒液。