一种人尿激肽原酶粗制品的制备方法

摘要：

本发明提供一种人尿激肽原酶粗制品的制备方法，包括如下步骤：收集吸附剂，洗脱，收集尿蛋白洗脱峰；进行超滤浓缩，调节pH为4～5.8，电导率为20～70mS/cm，得到浓缩液；上样金属螯合亲和层析柱，平衡液冲洗金属螯合亲和层析柱，然后使用水作为洗脱液进行洗脱，收集人尿激肽原酶洗脱峰；缓慢加入硫酸铵，搅拌，静置，收集沉淀，得到人尿激肽原酶粗制品。本发明属于色谱分离技术领域，本发明提高了人尿激肽原酶粗制品收率，降低了生产成本，获得的人尿激肽原酶粗制品产品质量好，KN比活高。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201611101691.X

申请日期：2016-12-02

公开/公告号：CN106754839A

公开/公告日：2017-05-31

主分类号：C12N9/64(2006.01)I

申请/专利权人:广东天普生化医药股份有限公司

发明/设计人:王旭;章华;何建国;曾永峰

主申请人地址:510520 广东省广州市天河区天河高唐科技产业园高普路89号

专利代理机构:北京精金石专利代理事务所(普通合伙) 11470

代理人:刘晔

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种人尿激肽原酶粗制品的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1收集吸附尿蛋白后的吸附剂，洗脱，收集尿蛋白洗脱峰；S2将步骤S1得到的尿蛋白洗脱峰进行超滤浓缩，调节pH为4～5.8，电导率为20～70mS/cm，得到浓缩液；S3将步骤S2得到的浓缩液上样金属螯合亲和层析柱，平衡液冲洗金属螯合亲和层析柱，然后使用水作为洗脱液进行洗脱，收集人尿激肽原酶洗脱峰；所述平衡液由0.5～2mol/L的磷酸盐缓冲液和0.01～0.1mol/L的醋酸溶液以3～5：1的体积比组成，平衡液的pH为4～5.8；S4向步骤S3得到的人尿激肽原酶洗脱峰中缓慢加入硫酸铵，搅拌，静置，收集沉淀，得到人尿激肽原酶粗制品。