一种β-肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法

摘要：

一种β-肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法，抽提外周血基因组DNA，以190 ng DNA为模板，在总反应体积50ul进行PCR扩增，引上游引物为5-CGCCCAATACCGCCAACAC-3，下游引物为5-CCACCAGGAGTCCCATCACC-3，PCR反应条件96℃预变性10min；94℃变性40s；复性60℃，40s；延伸71℃，1min，循环30次，最后一个循环72℃延伸5min。PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳，紫外线透射灯下检测210b处出现荧光带为特异性PCR产物。在PCR扩增产物中加入限制性内切酶BstNI，61℃酶切3h，酶切产物用3%琼脂糖凝胺电泳，紫外灯下观察结果。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201510596361.1

申请日期：2015-09-18

公开/公告号：CN106544402A

公开/公告日：2017-03-29

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:王永红

发明/设计人:王永红

主申请人地址:741000 甘肃省天水市秦州区莲亭路68号

国别省市代码:甘肃;62

权利要求：

一种β‑肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法，抽提外周血基因组DNA，以190 ng DNA为模板，在总反应体积50 ul进行PCR扩增，引上游引物为5‑CGCCCAATACCGCCAACAC‑3，下游引物为5‑CCACCAGGAGTCCCATCACC‑3，PCR 反应条件96 ℃预变性10 min；94 ℃变性40 s；复性60 ℃，40 s；延伸71 ℃，1 min，循环30次，最后一个循环72 ℃延伸5 min;PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳，紫外线透射灯下检测210 b处出现荧光带为特异性PCR产物;在PCR 扩增产物中加入限制性内切酶BstNI，61 ℃酶切3 h，酶切产物用3% 琼脂糖凝胺电泳。