ddPCR技术监控黑色素瘤患者对维罗非尼耐药的方法

摘要：

本发明提供了一种ddPCR技术监控黑色素瘤患者对维罗非尼耐药的方法，及其在监控维罗非尼治疗黑色素瘤过程中的应用。本发明首先对黑色素瘤患者外周血浆进行DNA抽提，再利用ddPCR技术检测其中NRAS的耐药突变位点Q61K的突变情况，并以此判定该患者是否产生耐药。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201510017298.1

申请日期：2015-01-13

公开/公告号：CN105838780A

公开/公告日：2016-08-10

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:上海宝藤生物医药科技股份有限公司%上海张江转化医学研发中心有限公司%上海宝藤医学检验所有限公司

发明/设计人:张桢珍;许骋;易静;丁飞飞;景兰;吴云鸣;楼敬伟;薛峰;傅深;杨治力;魏娅

主申请人地址:201203 上海市浦东新区祖冲之路899号3号楼

专利代理机构:上海一平知识产权代理有限公司 31266

代理人:崔佳佳%陆凤

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种对NRAS基因耐药突变位点进行检测的方法，其特征在于，包括步骤：(1)提供一检测样本，所述的检测样本是血浆样本或血液样品；(2)对所述的检测样本进行DNA抽提处理，从而获得含抽提DNA的DNA抽提物，其中对于每2毫升的检测样本而言，所述DNA抽提物是体积为20‑100微升且DNA浓度大于30ng/微升的提取液；(3)以步骤(2)所得到的DNA提取物为模板，进行微滴式数字PCR(ddPCR)，从而获得含所述的耐药突变位点的扩增产物；和(4)对所述扩增产物进行分析，从而得出NRAS基因耐药突变位点的突变形式和/或比例。