一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法

摘要：

本发明属于食源性病原菌分子检测技术领域，具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、LAMP检测的反应体系、显色溶剂和反应覆盖液。60℃温育50min，80℃5min后终止反应，电泳后阳性扩增产物为不同大小区带组成的阶梯式图谱。扩增产物中加入显色溶剂，肉眼观察结果，天蓝色为阳性，紫罗兰色为阴性。本发明特异性强，操作简单，结果易于观察，可用于基层单位对于临床样品中单核细胞增生李斯特菌的初步筛选和快速检测。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310353402.5

申请日期：2013-08-14

公开/公告号：CN103421904A

公开/公告日：2013-12-04

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:华中农业大学

发明/设计人:栗绍文;张超;孟宪荣;蔡旭旺;潘秀华

主申请人地址:430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号

专利代理机构:武汉宇晨专利事务所 42001

代理人:张红兵

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

一种以prfA基因作为靶基因进行单核细胞增生李斯特菌的环介导等温扩增即LAMP检测的引物组合，其特征在于，所述引物组合的DNA序列如下所示：外引物prfA‑B3：AAGCTTCCCGTTAATCGA；外引物prfA‑F3：GGCTTTCGTTATAATGTCTGG；内引物prfA‑BIP：AACTACTGAGCAAAAATCTTACGCAGCTAGACTGTATGAAACTTGTT；内引物prfA‑FIP：TAGCCTGCTCGCTAATGACTTTATTGATACAGAAACATCGGTT。