一种3个运动能力相关基因的PCR-LDR检测试剂盒
本发明公开了一种利用LDR法同时检测3个运动机能相关基因的联合检测试剂盒,该试剂盒可在3个小时内同时检测三个运动机能相关基因中的3个热点突变,该试剂盒包括PCR扩增试剂和LDR反应试剂;所述PCR扩增试剂包括:PCR缓冲液、MgCl2和dNTPs的反应混合物,Taq酶,超纯水,高特异性扩增ACTN3、EPO、CKMM三个基因中3个热点突变的引物混合物;所述LDR反应试剂试剂包括:PCR产物、10×连接缓冲液、LDR探针、Taq DN A连接酶等。一共包括3对PCR引物和3组检测探针。本试剂盒能完成一次性获得3个关键与运动能力显著相关基因的基因型,实现了对运动能力的高通量筛查。
发明专利
CN201310321448.9
2013-07-29
CN103352087A
2013-10-16
C12Q1/68(2006.01)I
山东省农业科学院高新技术研究中心
步迅;张全芳;刘艳艳;夏子芳
250100 山东省济南市历城区桑园路11号
山东;37
一种同时检测3个运动基因的PCR‑LDR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括包装盒体(1),PCR扩增和LDR反应试剂; 所述PCR扩增试剂分别为PCR扩增Reaction Mix(2)和(3);所述LDR反应试剂为LDR反应Probe Mix(4)和(5); 所述3个运动能力相关基因为ACTN3C>T,CKMM A>G,EPO T>G; 实验所需模板和引物如下: 其中用于ACTN3基因引物序列如下: ACTN3_M:5’P‑GTAGAGCTCGGGTTGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCACCTACTCATACC ACTN3_C:TTTTTTTTTTCCAAATGACCGTCCCTACTCT ACTN3_T:TTTTTTTTTTTTTCCCCCTATATCACCATCCGCCTAA 用于CKMM基因引物序列如下: CKMM_M:5’P‑TGGGACTTCTGCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAGCACCCTGCTACC CKMM_A:TTTTTTTTTTTTTTCACTAGATTACTTACCTAAGATCACCAACA CKMM_G:TTTTTTTTTTTTTTTTTTGACCCTCCATTATCTCTCAGGCC 用于EPO基因引物序列如下: EPO_M:5’P‑TTCATATTGAAGCGAGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTAAGCGCTCTTATG EPO_T:TTTTTTTTTTTTTTCTGCATGAGGTCTGGACGGTAG EPO_G:TTTTTTTTTTTTTTTTTCAGCCATCAGCCGTACAGGGCG。