一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法及其试剂盒

摘要：

本发明涉及一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法及其试剂盒。本发明根据大丽轮枝菌rDNA的ITS区设计一对特异性检测引物dali1/dali2，在大丽轮枝菌特异性检测中扩增出372bp的产物。取2μL DNA模板直接加入荧光定量PCR反应液中进行扩增；反应液中含有该对特异性引物及荧光染料，随着PCR反应的进行，实时检测反应体系的荧光强度，并根据分析软件计算Ct值，从而计算出样品中大丽轮枝菌的数量。本发明的试剂盒操作简便、快速，特异性好，灵敏度高；本发明提供的试剂盒可对大丽轮枝菌进行快速定量检测，可以替代一直沿用的分离培养的传统诊断方法，并适于在植物病害诊断检测领域广泛推广应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310321266.1

申请日期：2013-07-29

公开/公告号：CN103333969A

公开/公告日：2013-10-02

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:中国农业科学院植物保护研究所

发明/设计人:李园;曹坳程;郭美霞;王秋霞;欧阳灿彬;颜冬冬;毛连纲;马涛涛

主申请人地址:100193 北京市海淀区圆明园西路2号

专利代理机构:北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333

代理人:胡敬红

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种PCR快速检测大丽轮枝菌的方法，以大丽轮枝菌DNA为模板进行PCR反应，其特征在于，所述PCR反应体系中加入有一对特异性引物dali1/dali2，该特异性引物的序列分别为：特异性引物dali1：5’‑CCGCCGGTCCATCAGTCTCTCTG‑3’，特异性引物dali2：5’‑GCTTGTAGGGGGTTTAGAGGCAAGC‑3’。