PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用

摘要：

PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用，涉及一种重组质粒。所述构建方法：1)将PSG5-Myc-Fbw7质粒谱图信息与PcDNA3.1(+)质粒谱图信息比较，确定双酶切位点EcoR Ⅰ和NotⅠ；2)双酶切PSG5-Myc-Fbw7质粒；3)双酶切PcDNA3.1(+)质粒载体；4)通过琼脂糖凝胶电泳鉴定双酶切效率，将质粒载体PcDNA3.1(+)和目的基因Fbw7全长进行连接；5)将重组质粒转化感受态细菌，筛选阳性克隆，并进行测序鉴定，抽提PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒。所述PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒可用于制备治疗人胆管癌肿瘤药物。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310319435.8

申请日期：2013-07-26

公开/公告号：CN103352051A

公开/公告日：2013-10-16

主分类号：C12N15/85(2006.01)I

申请/专利权人:厦门大学附属成功医院%厦门大学

发明/设计人:李文岗;谷乐;郭跃

主申请人地址:361000 福建省厦门市思明区文园路94号

专利代理机构:厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200

代理人:马应森

国别省市代码:福建;35

权利要求：

PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒，其特征在于是通过提取人Fbw7基因全长，以含新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)质粒为载体，在PcDNA3.1(+)的和限制性酶切位点EcoRⅠ和Not Ⅰ之间插入Fbw7基因全长，构建的一种含Fbw7基因全长和新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒。