一株分泌抗2型猪链球菌表面蛋白Sao单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法

摘要：

本发明属于病原微生物免疫学检测技术领域，涉及一株分泌抗2型猪链球菌表面蛋白Sao单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法。本发明分泌抗2型猪链球菌表面蛋白Sao鼠源单克隆抗体细胞株是通过以甲醛灭活的猪链球菌2型菌株（05ZYH33）为免疫原免疫小鼠，在免疫后的小鼠体内抗体达到高峰时，用免疫后鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）融合，用ELISA法筛选出抗2型猪链球菌表面蛋白Sao鼠源单克隆抗体细胞株得到的。本发明的抗体具有很好的特异性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310270480.9

申请日期：2013-06-28

公开/公告号：CN103333863A

公开/公告日：2013-10-02

主分类号：C12N5/20(2006.01)I

申请/专利权人:中国人民解放军南京军区军事医学研究所

发明/设计人:潘秀珍;王晶;李敏;王长军;李先富;高基民

主申请人地址:210002 江苏省南京市中山东路293号

专利代理机构:南京天华专利代理有限责任公司 32218

代理人:夏平%傅婷婷

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

1株分泌抗2型猪链球菌表面蛋白Sao的单克隆抗体的杂交瘤细胞株2F1，其特征在于该杂交瘤细胞株通过如下方法制备：（1）采用灭活的2型猪链球菌菌株05ZYH33四次免疫雌性BALB/c小鼠，使小鼠体内抗体达到最高峰时分离脾脏B淋巴细胞；（2）将步骤（1）分离的脾脏B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合；（3）以纯化后的重组Sao蛋白为抗原包被ELISA板，使用重组Sao蛋白ELISA筛选阳性克隆；再进一步以重组Sao蛋白为抗原用Western blot法再次验证ELISA筛选得到的阳性克隆，最终获得杂交瘤细胞株2F1。