FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法

摘要：

本发明提供一种FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法，包括如下步骤：先用高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶；再用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应；最后加入阳离子荧光聚合物，通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量。该检测方法具有简单快速，成本较低的优点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310263449.2

申请日期：2013-06-27

公开/公告号：CN103305621A

公开/公告日：2013-09-18

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:武汉大学

发明/设计人:周翔;王天露;洪婷婷;郭璞

主申请人地址:430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学

专利代理机构:武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222

代理人:张火春

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

FRET原理的5‑羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）用高钌酸钾将DNA中的5羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶；（2）用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应：以回香胺为催化剂，在pH=5的醋酸铵缓冲溶液中带荧光的BODIPY化合物与含醛基的DNA在37℃条件下反应12h，用氯仿萃取产物；（3）加入阳离子荧光聚合物，通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量：将阳离子荧光聚合物加入到步骤（2）中的产物中，震荡离心，以380nm为发射波长，通过检测荧光强度来定量5羟甲基胞嘧啶的含量。