一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法

摘要：

本发明公开一种ssDNA-蛋白质酶法交联方法，包括以下步骤：（1）制备proA*与目标蛋白的融合蛋白，proA*来源于噬菌体ΦX174；（2）融合蛋白与ssDNA交联，ssDNA含有识别和结合序列。利用proA*可以识别、切割并催化特定序列的ssDNA与自身酪氨酸残基通过形成酯键相偶联的特性，以LDH为模式蛋白建立蛋白质与ssDNA高效交联的通用方法。本发明交联时引入的蛋白proA*不但不会影响其活力，而且对保持酶的活力有一定的辅助作用。本发明所实施的交联反应是在反应缓冲液中通过融合蛋白对于底物DNA序列的识别实现的，本发明所提供的方法高效、快速、简单、经济，具有巨大的实用性与通用性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310261812.7

申请日期：2013-06-27

公开/公告号：CN103361321A

公开/公告日：2013-10-23

主分类号：C12N9/04(2006.01)I

申请/专利权人:华东理工大学

发明/设计人:王天文;马兴元;马飞;王平

主申请人地址:200237 上海市徐汇区梅陇路130号

专利代理机构:上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218

代理人:施春花%翟羽

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种ssDNA‑蛋白质酶法交联方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备proA*与目标蛋白的融合蛋白，所述proA*来源于噬菌体ΦX174；（2）融合蛋白与ssDNA交联，所述ssDNA含有识别和结合序列。