一种C3H10T1/2 中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法

摘要：

本发明涉及细胞的诱导分化方法，特别涉及一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法，其步骤包括：将C3H10T1/2细胞培养于培养液中培养，细胞达80％-90％融合后加入0.25%胰酶5mL消化，细胞收缩呈圆形时终止胰酶消化反应，离心3-5分钟、沉淀、弃去上清，再加入培养液后吹打；按1：4比例传代培养到6孔板或12孔板培养，每2-4天更换培养液1次；待培养板上的细胞长满后置于诱导液A中，2天后撤去诱导液A换成诱导液B，2天后撤去诱导液B换成培养液，每2-4天更换培养液1次即可。本发明诱导分化成的脂肪细胞，可很好地运用到后续的实验中。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310254446.2

申请日期：2013-06-24

公开/公告号：CN103361307A

公开/公告日：2013-10-23

主分类号：C12N5/077(2010.01)I

申请/专利权人:上海交通大学医学院附属瑞金医院

发明/设计人:宁光;张晓燕;杨颖

主申请人地址:200025 上海市黄浦区瑞金二路197号

专利代理机构:上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227

代理人:吴瑾瑜

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法，其步骤包括：（1）、培养与传代：将C3H10T1/2细胞培养于培养液中，并置于5％CO2的培养箱中培养，待细胞达80％‑90％融合后加入0.25%胰酶5mL消化，细胞收缩呈圆形时加入培养液终止胰酶消化反应，离心3‑5分钟、沉淀、弃去上清，再加入培养液后吹打；按1：4比例传代培养到6孔板或12孔板，置于5％CO2的培养箱中培养，每2‑4天更换培养液1次；（2）、诱导分化：待步骤（1）中的培养板上的细胞长满后置于诱导液A中，2天后撤去诱导液A换成诱导液B，2天后撤去诱导液B换成培养液，每2‑4天更换培养液1次，待90%以上细胞呈圆形并出现大量脂滴，即表示C3H10T1/2细胞已诱导成功。