一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记

摘要：

本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记开发，属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pita基因凝胶电泳的检测方法，提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pita与pita在编码区第918氨基酸的G/T变异（Pita为G，pita为T），设计功能标记Pita-G/T。利用该标记进行两轮PCR扩增，第一轮PCR以基因组DNA为模板，利用Pita-G/T-out引物扩增；第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板，利用Pita-G/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度，通过熔解温度高低区分Pita和pita序列差异，从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310238711.8

申请日期：2013-06-17

公开/公告号：CN103333887A

公开/公告日：2013-10-02

主分类号：C12N15/11(2006.01)I

申请/专利权人:华南农业大学

发明/设计人:郭涛;罗文龙;陈志强;王慧;黄翠红;肖武名;刘永柱;张建国

主申请人地址:510642 广东省广州市天河区五山路483号

专利代理机构:广州粤高专利商标代理有限公司 44102

代理人:谢敏楠

国别省市代码:广东;44

权利要求：

 一种稻瘟病抗性基因功能标记Pita‑G/T，其特征在于，所述的Pita‑G/T由两对引物Pita‑G/T‑out、Pita‑G/T‑in构成，引物序列如下：    Pita‑G/T‑out：正向引物序列（5’‑3’）为SEQ ID NO:1；反向引物序列（5’‑3’） 为SEQ ID NO:2，Pita‑G/T‑in：正向引物序列（5’‑3’）为SEQ ID NO:3；反向引物序列（5’‑3’）为SEQ ID NO:4。