一种以链霉菌提制阿里沙霉素的方法

摘要：

一种以链霉菌提制阿里沙霉素的方法，是以三泽链霉菌(Streptomyces misawanensis)D35作为发酵菌株，制备发酵液；发酵液经萃取、浓缩得到的粗提物再经硅胶柱进行三次柱层析、薄层点板得活性组分，活性组分经制备型高效液相色谱柱纯化制备出纯化物，经鉴定为alisamycin（阿里沙霉素），其对多种植物病原菌具有较强的抑菌活性作用，尤其是烟草黑胫病菌。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310237077.6

申请日期：2013-06-14

公开/公告号：CN103305563A

公开/公告日：2013-09-18

主分类号：C12P17/02(2006.01)I

申请/专利权人:湖南农业大学

发明/设计人:朱宏建;周清明;刘双清;周鑫钰

主申请人地址:410128 湖南省长沙市芙蓉区东湖湖南农业大学

专利代理机构:长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113

代理人:何为%袁颖华

国别省市代码:湖南;43

权利要求：

一种以链霉菌提制阿里沙霉素的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：A、以三泽链霉菌(Streptomyces misawanensis)D35作为发酵菌株，制备发酵液；B、真空抽滤除去发酵液中的菌丝体，再采用乙酸乙酯进行萃取，得粗提液，将该粗提液在70℃真空浓缩制得粗提取物；C、将上述浓缩的粗提物上硅胶柱进行三次柱层析，第一次柱层析用乙酸乙酯作洗脱剂，第二次柱层析用乙酸乙酯和丙酮的混合洗脱液进行梯度洗脱，第三次柱层析用石油醚和丙酮的混合洗脱液进行梯度洗脱，并经薄层点板合并活性组分；D、将上述活性组分采用高效液相色谱进行纯化，得单体化合物，色谱条件如下：色谱柱:Prep MS C18Column10um,7.8×300mm，乙腈：水：乙酸的体积比为45：55：0.5作为流动相，柱温为35℃，流速为7mL/min，保留时间为30min，检测波长为279nm，进料量100μL；E、采用核磁共振氢谱及核磁共振碳谱技术对上述单体化合物进行结构鉴定，该单体化合物为阿里沙霉素。FDA00003345085000011.jpg