一种TEV蛋白酶表达工程菌及其构建和应用

摘要：

本发明涉及一种基于基因组的TEV蛋白酶表达体系。本体系是将受T7强启动子驱动的与麦芽糖结合蛋白基因malE融合的TEV蛋白酶基因和氯霉素抗性基因一起通过来源于λ噬菌体的重组酶所介导的同源重组方法整合至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)基因组中，并取代基因组中的malE基因区域而获得。所采用的是大肠杆菌表达菌株CGMCC No.7482。TEV蛋白酶可以采用亲和层析一步纯化，产量可达4.2mg/L。分离纯化TEV蛋白酶具有良好的酶切活性。本TEV蛋白酶表达体系可成为表达和纯化TEV蛋白酶的常规手段。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310224441.5

申请日期：2013-06-04

公开/公告号：CN103275917A

公开/公告日：2013-09-04

主分类号：C12N1/21(2006.01)I

申请/专利权人:南京师范大学

发明/设计人:尚广东;张飞飞;柴美霞;李玲

主申请人地址:210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号

专利代理机构:南京知识律师事务所 32207

代理人:卢亚丽

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种TEV蛋白酶表达工程菌，是大肠埃希氏菌(Escherichia coli)CGMCC No.7482。