一种使BCL11B蛋白降解的方法

摘要：

本发明公开了一种使BCL11B蛋白降解的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群；(2)加入多西环素促使Jurkat细胞表达KLF4；(3)获得表达出KLF4基因的Jurkat细胞蛋白和RNA；(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化；(5)对于(3)步获得的RNA，反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况，确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。本发明方法的优点是：发现了BCL11B特异性蛋白一条新的降解途径，一方面可以部分解释T-ALL细胞凋亡的原因，对白血病治疗有理论指导；另一方面为我们实现人T细胞转分化提供了新的思路。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310199598.7

申请日期：2013-05-27

公开/公告号：CN103409466A

公开/公告日：2013-11-27

主分类号：C12N15/867(2006.01)I

申请/专利权人:中国科学院广州生物医药与健康研究院

发明/设计人:李鹏;李田忠;蒋治武;昊东海

主申请人地址:510530 广东省广州市科学城开源大道190号

专利代理机构:北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312

代理人:蔡仲德

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种使BCL11B蛋白降解的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)利用慢病毒感染Jurkat细胞，得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群；(2)向经步骤(1)的得到的Jurkat细胞的RPMI‑1640培养基中加入多西环素，Jurkat细胞群的细胞密度为1×106个/ml，多西环素在细胞培养基中的质量浓度为1.5ug/ml，加入的多西环素促使Jurkat细胞开始表达KLF4；(3)获得表达KLF4的Jurkat细胞蛋白和RNA：在加入多西环素后的10h、20h、30h收集(2)中表达KLF4的Jurkat细胞，再将其裂解获得蛋白质和RNA；(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化情况；(5)对于(3)步获得的RNA，反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况，确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。