一种利用蛋白组技术获得钝顶螺旋藻耐盐功能基因的方法
本发明公开了一种利用蛋白组技术获得钝顶螺旋藻耐盐功能基因的方法,该方法包括以下步骤:培养三组螺旋藻,收集藻细胞,提取各组螺旋藻的全蛋白,测定蛋白样品的蛋白浓度;分离三个条件下螺旋藻的全蛋白,获得高分辨率的胶图,分析三个条件下螺旋藻的蛋白点,获得三个条件之间差异蛋白点的信息,鉴定差异蛋白的相关生物学信息;提取总RNA,反转录形成cDNA,建立基因的质粒标准品;检测分析基因的mRNA在0.02MNaCl和0.3MNaCl下的表达差异;检测差异表达基因的耐盐性。本发明提供了一种新的可用于抗盐植物、微生物基因工程育种的耐盐基因ORF1198,该基因为耐盐相关基因,可用于培育耐盐碱的转基因作物,具有良好的发展前景。
发明专利
CN201310159456.8
2013-04-26
CN103275993A
2013-09-04
C12N15/31(2006.01)I
温州医学院
包其郁;李佩珍;丁力;应俊;任凭;杨雷;李劲松
325035 浙江省温州市茶山高教园区温州医学院生命科学学院
浙江;33
一种利用蛋白组技术获得钝顶螺旋藻耐盐功能基因的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:培养三组螺旋藻,收集藻细胞,提取各组螺旋藻的全蛋白,测定蛋白样品的蛋白浓度;分离三个条件下螺旋藻的全蛋白,获得高分辨率的胶图,分析三个条件下螺旋藻的蛋白点,获得三个条件之间差异蛋白点的信息,鉴定差异蛋白的相关生物学信息;提取总RNA,反转录形成cDNA,建立基因的质粒标准品;检测分析基因的mRNA在0.02M NaCl和0.3M NaCl下的表达差异;检测差异表达基因的耐盐性。