一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达

摘要：

本发明涉及一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达。利用大肠杆菌发酵生产类人胶原蛋白时，乙酸积累会影响菌体生长及蛋白表达，而现有减少乙酸副产物的方法会降低胶原蛋白产量。本发明以保藏编号为CGMCCNo.0743的大肠杆菌BL21为出发菌，采用Red同源重组，用安普霉素抗性基因替换大肠杆菌基因组上的ptsG基因，然后通过质粒pCP20表达的FLP内切酶消除安普霉素抗性基因，得到敲除ptsG基因的大肠杆菌工程菌CGMCCNo.7331。本发明通过基因工程手段改造大肠杆菌葡萄糖吸收途径，减少乙酸积累，提高类人胶原蛋白的积累，葡萄糖的消耗量减少9%-28%，类人胶原蛋白的产量可提高20%-30%。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310157411.7

申请日期：2013-05-02

公开/公告号：CN103224901A

公开/公告日：2013-07-31

主分类号：C12N1/20(2006.01)I

申请/专利权人:西北大学

发明/设计人:范代娣;骆艳娥;马晓轩

主申请人地址:710068 陕西省西安市太白北路229号

专利代理机构:西安新思维专利商标事务所有限公司 61114

代理人:李罡

国别省市代码:陕西;61

权利要求：

一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌，其特征在于：所述的重组菌于2013年3月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC?No.7331。