一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞

摘要：

本发明公开了一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明使用电穿孔的方法将打靶载体pCSN2-Lys-Neo-EGFP和锌指核酸酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，经过G418药物筛选和PCR分析后获得了打靶的阳性克隆细胞，以打靶的阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎，为研制抗乳房炎的转基因奶牛提供坚实的基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310126017.7

申请日期：2013-04-11

公开/公告号：CN103215295A

公开/公告日：2013-07-24

主分类号：C12N15/63(2006.01)I

申请/专利权人:西北农林科技大学%杨凌科元克隆股份有限公司

发明/设计人:刘旭;张涌;王勇胜;郭文江;权富生

主申请人地址:712100 陕西省西安市杨凌区邰诚路3号

专利代理机构:西安通大专利代理有限责任公司 61200

代理人:汪人和

国别省市代码:陕西;61

权利要求：

一种Lys乳腺特异性打靶载体，其特征在于，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β?酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。