一种优秀冰雪运动员线粒体DNA分离与纯化方法

摘要：

本发明对已有的mtDNA的提取和纯化方法进行整合和改进，形成一种新的提取与纯化方法，克服了Triton法产量低、易降解的弊端。高盐沉淀法操作简单，易重复，可依需用量扩大反应体系，使mtDNA质量得以轻松控制且纯度较高。鉴于优秀冰雪运动员较于常人的特殊体质特征，该方法特别适用于优秀冰雪运动员血液来源的mtDNA的提取与纯化方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310121674.2

申请日期：2013-04-10

公开/公告号：CN103173437A

公开/公告日：2013-06-26

主分类号：C12N15/10(2006.01)I

申请/专利权人:哈尔滨体育学院

发明/设计人:刘春华;郑丽;徐金庆;孙玉姣;陆涛峰;关伟军

主申请人地址:150008 黑龙江省哈尔滨市南岗区大成街1号

国别省市代码:黑龙江;23

权利要求：

一种改进的高盐法提取与纯化mtDNA方法，其特征在提取mtDNA的高获得性。1)加入裂解细胞的溶液A、B后离心的转速分别上升到3000r/min与3500r/min，但是离心时间分别降低到8min与10min。2)mtDNA的纯化方法中将用异丙醇沉淀mtDNA的离心转速降低到13000r/min同时离心时间增加到25min。3)高盐法提取mtDNA中增加了消化RNA步骤，即用TE溶解的RNase(200mg/mL)，37℃，30min。