一种产热稳定性重组胰蛋白酶的酵母工程菌及其应用

摘要：

本发明公开了一种产热稳定性重组胰蛋白酶的酵母工程菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明通过将体外扩增所得的胰蛋白酶基因融合前导短肽YVEF，并将其整合连接到毕赤酵母GS115（Pichia pastoris）染色体上，构建了一株高效分泌表达重组胰蛋白酶的价目工程菌，纯化后得到热稳定提高的重组胰蛋白酶，在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶，解决了胰蛋白酶热稳定性低的问题。应用该菌种生产胰蛋白酶，产量相对较高、工艺相对简单、所使用工程菌株遗传及应用背景清晰，便于工业化应用。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310076829.5

申请日期：2013-03-11

公开/公告号：CN103173367A

公开/公告日：2013-06-26

主分类号：C12N1/19(2006.01)I

申请/专利权人:江南大学

发明/设计人:陈坚;令桢民;马腾博;堵国成;康振;李江华

主申请人地址:214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号

专利代理机构:北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419

代理人:何自刚%王玉松

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种产热稳定性重组胰蛋白酶的酵母工程菌及其应用，其特征在于采用毕赤酵母宿主(Pichia pastoris)GS115为宿主，表达重组胰蛋白酶基因，所述重组胰蛋白酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。