PCR酶切分型检测军团菌试剂盒及其应用

摘要：

本发明为公开了一种PCR酶切分型检测军团菌试剂盒，包括PCR反应液、酶切反应液、阴性对照及阳性对照。采用一对军团菌特异引物扩增16S?rRNA基因上的区域，在该扩增片段存在一个嗜肺军团菌特异的酶切位点，通过一个PCR-酶切反应便可对军团菌及嗜肺军团菌进行鉴定。该检测试剂盒操作简便快速，结果直观，且灵敏度高，特异性好，稳定性好，可以广泛应用于可疑菌株、土壤和环境水样本及其它样本的军团菌及嗜肺军团菌的快速鉴定。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310072984.X

申请日期：2013-03-07

公开/公告号：CN103184283A

公开/公告日：2013-07-03

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:广州金域医学检验中心有限公司

发明/设计人:朱庆义;胡朝晖;赵利伟;顾全

主申请人地址:510000 广东省广州市海珠区新港东路2429号三楼

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种PCR酶切分型检测军团菌试剂盒，其特征在于：由PCR反应液、酶切反应液、阴阳性对照品组成；（1）PCR反应液包括：针对军团菌特异位点设计的上游引物和下游引物各36μl2×PCR?Master?Mix??500μl双蒸水dd?H2O??300～340μl（2）酶切反应液包括：10×酶切缓冲液??40μl限制性内切酶FastDigest?HinfⅠ酶??20μl双蒸水dd?H2O??330～350μl（3）阴阳性对照品所述阴性对照为1×104个菌/ml的大肠杆菌培养物??0.5ml所述阳性对照为1×104个菌/ml的嗜肺军团菌培养物??0.5ml。