一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1活菌制剂的制备方法
本发明涉及一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1活菌制剂的制备方法,适用于家禽畜牧业中饲用功能性活菌制剂等微生态制剂的生产。本发明利用筛选自藏灵菇中的产胆盐水解酶的干酪乳杆菌KL1菌株,经过活化、扩大培养、高密度发酵、离心浓缩、加入冻干保护剂、预冻和冷冻干燥等工序制备活菌制剂。本发明利用全自动发酵罐优化发酵条件,并利用马铃薯粉浆作为冻干保护基质,确定冻干保护剂较优组合配方,使KL1菌株的活菌数量可达1010CFU/g以上,存活率达到85%以上。本发明制备的活菌制剂价格低廉,活菌含量高,可作为家禽饲料添加剂,具有鸡生长速度快、饲料用量省、少生病等特点。它不仅有降低鸡蛋胆固醇的效果,而且具有调节鸡的肠道菌群平衡作用,对鸡白痢有较好预防和治疗作用。
发明专利
CN201310068240.0
2013-03-05
CN103146607A
2013-06-12
C12N1/20(2006.01)I
北京农学院
刘慧;谢远红;张红星;周妍;熊利霞;高秀芝
102206 北京市昌平区回龙观镇北农路7号
北京;11
一种利用菌株KL1CGMCC No.1809为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的产胆盐水解酶乳酸菌制备活菌制剂的方法,其特征在于:将干酪乳杆菌KL1扩大培养液按3%的接种量移种至2L改良MRS发酵培养基中,利用5L全自动发酵罐进行灭菌和高密度发酵,控制发酵温度40℃,发酵液pH6.4,搅拌转速55r/min,发酵时间20h,得到发酵液;将发酵液于4℃、5000r/min离心15min,收集得到菌泥;在600mL冻干瓶中按离心前发酵液1/10体积的量,加入马铃薯粉浆作为冻干保护基质,再加入3.5%谷氨酸钠、2.0%脱脂奶粉和1.5%甘油的冻干保护剂与收集的菌泥,混合均匀后,得到浓缩发酵剂;将每个冻干瓶装量为100mL的浓缩发酵剂于‑34℃预冻15h至完全冻结状态,得到预冻活菌制剂;利用美国产6L LABCONCO真空冷冻干燥机将预冻活菌制剂于‑55℃、真空度0.16mBar的条件下,冻干48h至完全干燥状态,得到干酪乳杆菌KL1冻干活菌制剂。