一种体外诱导胚胎干细胞分化为神经元的方法

摘要：

一种体外诱导胚胎干细胞分化为神经元的方法，包括如下步骤：分离，通过差速贴壁法将MEF与ES进行分离；EB悬浮，加入EB形成液重悬细胞，每10cm细菌培养皿接种浓度为2-3×106，培养2-4d，每1-2d进行换液；RA神经元诱导，使用浓度为1-5×10-7M的RA进行诱导2-4d，每2d进行换液；EB贴壁培养，使用PLL包被培养板，将EB接种于包被的培养板上，加入适量的EB形成液，培养1-2d；后期神经元诱导，使用神经元培养液培养。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310048466.4

申请日期：2013-02-06

公开/公告号：CN103266082A

公开/公告日：2013-08-28

主分类号：C12N5/0793(2010.01)I

申请/专利权人:赛业（广州）生物科技有限公司%赛业（苏州）生物科技有限公司

发明/设计人:陈丽娟;陈银娜

主申请人地址:510663 广东省广州市科学城掬泉路3号国际企业孵化器D区三至五楼

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种体外诱导胚胎干细胞分化为神经元的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤A，分离，通过差速贴壁法将MEF与ES进行分离；步骤B，EB悬浮，加入EB形成液重悬细胞，每个10cm细菌培养皿接种浓度为2‑3×106Cells，培养2‑4d，每1‑2d进行换液；步骤C，RA神经元诱导，使用浓度为1‑5×10‑7M的RA进行诱导2‑4d，每1‑2d进行换液；步骤D，EB贴壁培养，使用PLL包被培养板，将EB接种于包被的培养板上，加入适量的EB形成液，培养1‑2d；步骤E，后期神经元诱导，使用EB形成液和神经元培养液培养。