一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法
一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法,属于蛋白质组学和基因工程领域。本发明首先通过2-DE技术结合质谱技术鉴定出钝齿棒杆菌胞内高表达蛋白点。克隆其编码基因启动子,分别命名为P-argC、P-argG、P-argF、P-ilvC和P-serA,替换穿梭载体pDXW-8上的tac启动子,并在其下游插入cat基因,分别转化大肠杆菌JM109和钝齿棒杆菌SYPA5-5,通过测定CAT的活性,各启动子在重组菌中的活性:P-argG>P-argF>P-ilvC>P-serA>P-argC。这是首次获得来自钝齿棒杆菌组成型高表达启动子,为钝齿棒杆菌高表达外源基因提供了有效的工具。
发明专利
CN201310043507.0
2013-02-04
CN103074343A
2013-05-01
C12N15/113(2010.01)I
江南大学
饶志明;许正宏;张博慧;徐美娟
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学
江苏;32
一种利用2‑DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高活性启动子的方法,其特征是:通过2‑DE技术筛选钝齿棒杆菌内高表达蛋白质,通过MALDI‑TOF‑MS及MS/MS分析鉴定和数据库检索,鉴定出这些蛋白的种类,在GENBANK网站上检索出这些蛋白的编码基因序列,克隆其上游的启动子序列。