一种siRNA表达载体及其应用

摘要：

本发明公开了一种用于构建siRNA表达载体的空载体及其重组载体和应用。该空载体从5’到3’依次包括：1）来源于CMV?RNA聚合酶II依赖型启动子序列；2）pri-MiR21前部片段序列SEQ?ID?NO.1；3）限制性内切酶酶切位点序列；4）pri-MiR21后部片段序列SEQ?ID?NO.2；5）终止子序列。在限制性内切酶酶切位点插入序列siRNA正义序列-MiR21环结构序列-siRNA反义序列，即得siRNA重组表达载体。本发明采用RNA?Pol?II启动子，可方便有效地将shRNA连接到pri-MiR21骨架上，使shRNA经由RNAPol?II启动子稳定表达，且表达高效，提高了RNAi的敲减效率。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310038942.4

申请日期：2013-01-31

公开/公告号：CN103205461A

公开/公告日：2013-07-17

主分类号：C12N15/85(2006.01)I

申请/专利权人:上海黄离生物科技有限公司

发明/设计人:姚远颋;王海峰;费倩岚;谈竹君;劳昕元

主申请人地址:200233 上海市徐汇区桂平路333号6号楼306室

专利代理机构:上海智信专利代理有限公司 31002

代理人:朱水平%沈利

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种用于构建siRNA表达载体的空载体，其特征在于，其序列从5’到3’依次包括以下序列：1）来源于CMV?RNA聚合酶II依赖型启动子序列；2）pri?MiR21前部片段序列，其序列如序列表中SEQ?ID?NO.1所示；3）限制性内切酶酶切位点序列；4）pri?MiR21后部片段序列，其序列如序列表中SEQ?ID?NO.2所示；和5）终止子序列。