一种制备脑钠肽的方法及应用

摘要：

本发明公开了一种制备脑钠肽的方法，该方法包括：改造全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；将改造后的脑钠肽编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；所得菌体破菌，离心分离，过Ni-NTA柱纯化；本发明制备脑钠肽操作非常简单，制备成本低，成品产率高，纯度高而且具有高生物活性，作为抗原物质可进行动物免疫，筛选相关抗体，同时为尽快建立国内临床化学诊断急需的校准品制备平台，研制诊断试剂标准物质和参考品奠定基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210578484.9

申请日期：2012-12-28

公开/公告号：CN103014014A

公开/公告日：2013-04-03

主分类号：C12N15/16(2006.01)I

申请/专利权人:张培影

发明/设计人:张培影

主申请人地址:221009 江苏省徐州市解放路199号

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种制备脑钠肽的方法，其特征在于，该方法包括：1)改造全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列，去除大肠杆菌稀有密码子；2)将步骤1)中改造后的脑钠肽编码基因序列插入表达载体中，并用大肠杆菌菌株转化表达；3)将转化表达菌株接种于LB培养基，IPTG诱导；4)所得菌体破菌，离心分离，过Ni??NTA柱纯化；其中，步骤1)中改造后的全基因合成人源化脑钠肽编码基因序列为：1??????ATGGACCCGC??AGACCGCTCC??GTCTCGTGCT??CTGCTGCTGC??TGCTGTTCCT??GCACCTGGCT61????TTCCTGGGTG??GTCGTTCTCA??CCCGCTGGGT??TCTCCGGGTT??CTGCTTCTGA??CCTGGAAACC121??TCTGGTCTGC??AGGAACAGCG??TAACCACCTG??CAGGGTAAAC??TGTCTGAACT??GCAGGTTGAA181??CAGACCTCTC??TGGAACCGCT??GCAGGAATCT??CCGCGTCCGA??CCGGTGTTTG??GAAATCTCGT241??GAAGTTGCTA??CCGAAGGTAT??CCGTGGTCAC??CGTAAAATGG??TTCTGTACAC??CCTGCGTGCT301??CCGCGTTCTC??CGAAAATGGT??TCAGGGTTCT??GGTTGCTTCG??GTCGTAAAAT??GGACCGTATC361??TCTTCTTCTT??CTGGTCTGGG??TTGCAAAGTT??CTGCGTCGTC??ACTAG