一种利用微生物发酵提高剑麻皂苷产率的方法
本发明公开了一种利用微生物发酵提高剑麻皂苷产率的方法。使用的目的菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期:2011年2月25日,保藏编号:CCTCC NO:M2011050,分类命名: 棒杆菌GLHZB21,即Corynebacterium sp.GLHZB21,目的菌株经发酵和培养后,加入剑麻废料中,经发酵、离心,取得上清液,在真空干燥箱中去水烘干,即提取到剑麻皂苷。本发明利用微生物发酵可明显提高皂苷产率,与现在流行的酸碱化学提取方法相比产率可提高30%左右,且该微生物具有安全环保、成本低、降解速度快、降解率高等特点,因此该内容可以用于传统的皂苷工业生产中,取代目前的酸碱化学提取工艺方法。
发明专利
CN201210561720.6
2012-12-22
CN103146794A
2013-06-12
C12P33/20(2006.01)I
桂林理工大学
郝再彬;王彦超;周菲菲;王秀丽;李海云
541004 广西壮族自治区桂林市建干路12号
广西;45
一种利用微生物发酵提高剑麻皂苷产率的方法,其特征在于具体步骤为:(1)制备培养基:a.称取去皮土豆100‑250克,并将土豆切成方块,加0.5‑2.0升水后加热煮沸20‑40分钟,之后冷却至室温,用四层纱布过滤,所得滤液定容至0.5‑2.0升,备用;b.取步骤(1)第a步所制得的备用滤液0.05‑1.5升置于三角瓶中,再向三角瓶内加入1.0‑2.0克的琼脂粉,用牛皮纸包扎三角瓶口,在1.103MPa、121℃条件下灭菌20分钟,然后将三角瓶内产物迅速地倒入直径为9厘米的培养皿内,加盖,待琼脂凝固后,即制得固体培养基,备用;c.将步骤(1)第a步所制得的备用滤液中剩余的滤液0.5‑1.95升移至1.0‑2.5升容器内,用牛皮纸包扎瓶口,在1.103MPa、121℃的条件下灭菌20分钟,制得液体发酵培养基,备用;(2)目的菌株的平面培养和发酵培养:在无菌条件下,将斜面保存的目的菌株涂布在步骤(1)第b步制得的固体培养基上,20‑35℃下培养36小时,然后取出菌株,接种到50‑200毫升步骤(1)第c步制得的液体发酵培养基中,在28‑36℃下以100‑300转/分钟的速度摇床振荡发酵培养72小时,制得发酵液;所述目的菌株微生物现保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期:2011年2月25日,保藏编号:CCTCC NO:M2011050,分类命名: 棒杆菌GLHZB21即Corynebacterium sp.GLHZB21;(3)剑麻废料中剑麻皂苷的提取:取步骤(2)制得的发酵液30毫升置于离心管中,4000‑6000 转/分钟的转速离心20分钟,弃上清液,剩余部分加入到100毫升无菌水中稀释,稀释后的菌液中加入5‑20克剑麻废料,在摇床上以200转/分钟的振荡速度发酵24小时后,取发酵液5毫升,以4000‑6000 转/分钟的转速离心15分钟,取上清液,在真空干燥箱中去水烘干,即提取到剑麻皂苷。