一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法

摘要：

本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K，并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO：M 2012266的菌株中，经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210552718.2

申请日期：2012-12-19

公开/公告号：CN102994541A

公开/公告日：2013-03-27

主分类号：C12N15/81(2006.01)I

申请/专利权人:江南大学

发明/设计人:陈坚;顾磊;张娟;堵国成;沈伊娜;闻一凡;李梦洁;李婷;丁雪

主申请人地址:214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号

专利代理机构:北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419

代理人:何自刚%王玉松

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法，其特征在于，是将毕赤酵母UPR关键基因Haclp连接到毕赤酵母表达载体pPICZα上，将其下游靶基因连接到表达载体pPIC3.5K上，并将下游靶基因表达质粒与Haclp表达质粒一起转化入Pichia pastoris GS115‑pPIC9K‑GOD中得到的基因工程菌。