一种体外扩增γδT细胞的方法

摘要：

本发明涉及γδT细胞培养方法，具体涉及一种体外扩增γδT细胞的方法，该方法的操作步骤如下：抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶，备用。分离患者外周血单个核细胞（PBMC），用含5%自体血浆的无血清培养基将PBMC浓度调整为1×106 /ml，再将PBMC细胞悬液转入T75培养瓶中，加入含有适当浓度Zoledronat，HSP70，IL-2，IL-7，IL-15的初始培养基，37℃、5%CO2的饱和湿润环境中培养，根据细胞的生长情况，每2~3天更换培养基，将细胞浓度控制在2.5×106 /ml左右，同时全量补充Zoledronat，HSP70，IL-2和IL-7，IL-15，持续培养12~16天后，即可获得大量较高纯度的γδT细胞。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210541657.X

申请日期：2012-12-13

公开/公告号：CN102994448A

公开/公告日：2013-03-27

主分类号：C12N5/0783(2010.01)I

申请/专利权人:上海柯莱逊生物技术有限公司

发明/设计人:解尚云;叶永清;谭令兵

主申请人地址:201201 上海市浦东新区张江高科技产业东区瑞庆路528号20幢乙号4、5层

专利代理机构:上海三方专利事务所 31127

代理人:吴干权%钱品兴

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种体外扩增γδT细胞的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：a.用抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶以备用，b.将外周血单个核细胞转入包被的T75培养瓶中，加入含有唑来膦酸、HSP70、IL‑7、IL‑15和IL‑2的无血清培养基，放入二氧化碳培养箱培养12~16天后获得大量较高纯度的γδT细胞。