一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法
本发明涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法,包括如下步骤:(1)将海洋胶原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl缓冲液中,配成酶浓度为0.3~0.5mg/mL的酶液;(2)将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中,在水浴锅中反应,在4℃条件下,离心后超滤,制得胶原蛋白小肽。本发明根据海洋细菌胶原蛋白酶MCP-01催化结构域的特点,设计最佳降解条件,使海洋胶原蛋白酶MCP-01高效降解胶原蛋白,产生的胶原蛋白小肽分子量小于1000Da的肽段占85%以上,从而使其降解产物在医药、食品、化妆品等高附加值领域中具有巨大的应用潜力。
发明专利
CN201210540438.X
2012-12-13
CN102994601A
2013-03-27
C12P21/06(2006.01)I
山东大学
张玉忠;冉丽媛;王磊;刘德华;陈秀兰;宋晓妍;秦启龙;苏海楠;周百成
250012 山东省济南市历下区文化西路44号
济南金迪知识产权代理有限公司 37219
王绪银
山东;37
一种利用海洋胶原蛋白酶MCP‑01制备胶原蛋白小肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将海洋胶原蛋白酶MCP‑01溶于Tris‑HCl缓冲液中,配成酶浓度为0.3~0.5mg/mL的酶液;(2)按照重量体积比为18~22:1的比例将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中,单位mg/ml,在45~50℃的水浴锅中反应24~26小时,在4℃条件下,13000转/分钟离心10~15min,制得胶原蛋白肽;(3)上述胶原蛋白肽经过截留量为3000Da的超滤管超滤离心,收集下层滤过物,即制得胶原蛋白小肽。