一株产莽草酸的大肠杆菌重组菌及其构建方法及应用
一株产莽草酸的大肠杆菌重组菌及其构建方法及应用,属于微生物基因工程技术领域。本发明首先利用分子生物学技术删除了大肠杆菌CICIMB0013的莽草酸激酶I基因(aroK)、莽草酸激酶II基因(aroL),以及葡萄糖磷酸转移酶系统的关键蛋白EIIBCGlc的基因(ptsG)和圭尼酸/莽草酸脱氢酶基因(ydiB),获得了大肠杆菌突变株CICIMB0013·SA4(△aroK,△aroL,△ptsG,△ydiB)。本发明还构建了含有莽草酸代谢途径中关键基因aroG*,ppsA,tktA的重组表达质粒pTHGAA,然后将重组表达质粒pTHGAA电转入重组菌CICIMB0013·SA4中,获得高效生产莽草酸的重组菌大肠杆菌B0013(SA4/pTHGAA)。本发明的大肠杆菌重组菌能够实现发酵过程中莽草酸的高效累积。
发明专利
CN201210533913.0
2012-12-12
CN102994439A
2013-03-27
C12N1/21(2006.01)I
江南大学
陈献忠;李明明;王正祥
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学生物工程学院
无锡市大为专利商标事务所 32104
时旭丹%刘品超
江苏;32
一株产莽草酸的大肠杆菌重组菌株,其分类命名为大肠杆菌(Escherichia coli)B0013(SA4/pTHGAA),该重组菌株染色体DNA中有4个基因被删除,同时有1~3个基因过量表达;删除的基因为:莽草酸激酶I基因aroK,莽草酸激酶II基因aroL,葡萄糖磷酸转移酶系统的关键蛋白EIIBCGlc基因ptsG和圭尼酸/莽草酸脱氢酶基因ydiB;过量表达的基因是:3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮糖‑7‑磷酸合成酶基因aroG*,转酮酶A基因tktA,磷酸烯醇式丙酮酸合成酶A基因ppsA中的1~3个。