一种人羊膜上皮细胞体外免疫调控淋巴细胞分子机制的检测方法

摘要：

本发明提出一种人胎盘来源的MSCs体外表现为抑制T细胞活性及增殖作用机制的检测方法。鉴于协同共刺激分子在T细胞活化增殖中所起的重要作用，本发明大胆推测胎盘来源的MSCs体外表现出对T细胞负性调控作用可能系其高表达负性协同刺激分子PD-L1有关，首先通过实验验证PMSCS对活化T细胞具有明显抑制作用，再以负性协同刺激分子PD-L1为切入点，通过流式细胞仪检测、免疫荧光染色、3H-TdR掺入法、ELISA等实验分析PD-L1在PMSCS介导的T细胞体外增殖抑制作用中所扮演的角色，从而验证PD1-PD-L1分子通路是PMSCS体外调节T细胞免疫耐受的主要信号机制。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210506256.0

申请日期：2012-12-02

公开/公告号：CN103045711A

公开/公告日：2013-04-17

主分类号：C12Q1/02(2006.01)I

申请/专利权人:吴卫江

发明/设计人:徐杰;房文峰;朱爱华

主申请人地址:214041 江苏省无锡市兴源北路585号市三院神经外科组

专利代理机构:常州市维益专利事务所 32211

代理人:何学成

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种人类AECS体外免疫抑制作用分子机制的检测方法，其包括下述步骤：??S1：羊膜上皮细胞分离培养与鉴定；??S2：免疫荧光染色法检测羊膜上皮细胞中PD??L1表达；??S3：PD??L1mAb阻断AECS对T细胞增殖的抑制作用检测；??S4：AECS与T细胞体外共培养及PD??L1阻断实验；??S5：T细胞活性早期标志CD69的检测；??S6：AECS对活化T细胞周期影响的检测；??S7：AECS对活化T细胞细胞因子分泌影响的检测。??