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一种利用RNAi技术培育抗多种病毒烟草的方法

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一种利用RNAi技术培育抗多种病毒烟草的方法,通过对GenBank中4种病毒(CMV、PVY、PVX、TMV)的多条基因组全长序列进行比对,筛选到4种病毒在基因组范围内的相对保守区域;最终选定各病毒序列,人工合成800bp的嵌合基因;依此构建了嵌合基因的RNAi植物表达载体,通过农杆菌转化普通烟草,获得转基因植株。本发明的特点是:以我国四种主要烟草病毒为对象,利用植物基因工程技术将人为构建的包含四种病毒序列的发夹状结构转入烟草中,使烟草转录出的发夹状双链RNA结构在植物自身机制下剪切成小RNA(siRNA),特异性地干扰、降解或沉默靶标病毒基因在烟草植株体内的正常复制和积累,筛选获得抗多种烟草病毒的烟草新材料。

发明专利

CN201210440489.5

2012-11-07

CN102943091A

2013-02-27

C12N15/84(2006.01)I

中国烟草总公司郑州烟草研究院

杨军;张俊祺;宋纪真;王燃;罗朝鹏;李锋;魏春阳;曹培健;林福呈

450001 河南省郑州市高新区枫杨街2号

郑州中民专利代理有限公司 41110

姜振东

河南;41

一种利用RNAi技术培育抗多种病毒烟草的方法,其特征在于:通过对GenBank中4种病毒CMV、PVY、PVX、TMV的多条基因组全长序列进行比对,筛选到4种病毒在基因组范围内的相对保守区域;最终选定各病毒序列,连接成800bp的嵌合基因;依此构建了嵌合基因的RNAi植物表达载体,通过农杆菌转化普通烟草,获得转基因植株,经检测得到转化成功的植株。
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2014-04-09授权
2013-03-27实质审查的生效
2013-02-27公开
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