一种RNA的等温检测方法

摘要：

本发明提供一种RNA的定性和定量等温检测方法，本方法的检测方法是采用脱氧核酶(DNAzyme)定点剪切RNA后经链置换等温扩增技术(SDA)进行扩增，通过检查SDA产物中释放出的报告基团G-四聚体来进行定性或定量检测。该方法能够迅速、简便、并且高灵敏特异地检测微量的RNA，包括mRNA和miRNA，同时降低被污染的危险性。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210419777.2

申请日期：2012-10-29

公开/公告号：CN103014148A

公开/公告日：2013-04-03

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:中国科学院成都生物研究所

发明/设计人:唐卓;赵永云

主申请人地址:610041 四川省成都市武侯区人民南路四段九号

专利代理机构:成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212

代理人:张帆%肖国华

国别省市代码:四川;51

权利要求：

一种RNA的等温检测方法，包括以下几个步骤：a)基于剪切RNA的DNAzyme，实现对RNA的定点剪切；b)被剪切的RNA在多聚核苷酸激酶，D??NA聚合酶和限制性内切酶作用下发生三个链置换等温扩增循环；其中，经第一个链置换等温扩增循环释放出一系列的D??NA寡核苷酸小片段trigger；然后与待测样品中含有的能产生G??四聚体的互补的寡核苷酸探针结合发生第二个链置换等温扩增循环释放出G??四聚体；此G??四聚体与具有剪切RNA功能的DNAzyme结合发生第三个链置换等温扩增循环又释放出小片段trigger，由此再引发第二个链置换等温扩增，释放出G??四聚体，此G??四聚体又引发第三个链置换等温扩增，然后第二和第三两个循环往复进行，从而最终置换下大量的G??四聚体；c)根据释放出的G??四聚体的性质，可作为定性报告基团或定量报告基团，对RNA进行定性或实时定量检测。