一种二氢乳清酸酶法制备α-天冬氨酰小肽的方法

摘要：

本发明公开了一种二氢乳清酸酶法制备α-天冬氨酰小肽的方法。该方法包括下列步骤：采用二氢乳清酸与氨基酸酯或小二肽类酯化合物进行接肽反应，形成二氢乳清酸小肽酯类化合物；进而采用稀碱溶液水解酯键，暴露出末端羧基；利用二氢乳清酸酶水解暴露出相应羧基的二氢乳清酸小肽类化合物，形成N-氨甲酰化天冬氨酰小肽化合物；进而采用亚硝酸水解脱去氨甲酰基团即可获得α-天冬氨酰小肽类化合物。本发明方法采用二氢乳清酸环共保护天冬氨酸中的α-氨基和β-羧基，仅暴露出α-羧基，保证了接肽反应的位置专一性；同时采用酶法水解开环，避免了多数化学合成中反复的保护与脱保护步骤，操作简单，减少了副反应的发生。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210379592.3

申请日期：2012-10-09

公开/公告号：CN102864196A

公开/公告日：2013-01-09

主分类号：C12P21/02(2006.01)I

申请/专利权人:南京工业大学

发明/设计人:武红丽;曹飞;张煜;薄薇;周佳栋;姚琴

主申请人地址:211816 江苏省南京市浦口区浦珠南路30号

专利代理机构:南京经纬专利商标代理有限公司 32200

代理人:李纪昌%曹翠珍

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种二氢乳清酸酶法制备α?天冬氨酰小肽(1)的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：??1）以L?二氢乳清酸为原料，与氨基酸酯或小二肽类酯化合物在接肽试剂作用下进行接肽反应，形成L?二氢乳清酸小肽酯类化合物；2）采用稀碱溶液处理L?二氢乳清酸小肽酯类化合物，水解酯键，暴露出末端羧基；3）以二氢乳清酸酶或含有二氢乳清酸酶的菌体为催化剂，在弱碱性条件下水解暴露出末端羧基的L?二氢乳清酸小肽类化合物，形成N?氨甲酰化?α?天冬氨酰小肽化合物；4）采用亚硝酸水解脱去N?氨甲酰化?α?天冬氨酰小肽化合物的氨甲酰基团即可获得α?天冬氨酰小肽类化合物。