一种单克隆杂交瘤的制备方法

摘要：

本发明提供了一种单克隆杂交瘤细胞的制备方法，包括以下步骤：步骤一，融合：使用聚乙二醇水溶液融合骨髓瘤细胞与抗原免疫后的淋巴细胞，得融合细胞；步骤二，培养：将融合细胞接入HAT液体培养基中于二氧化碳培养箱中培养，得杂交瘤细胞；步骤三，筛选：将杂交瘤细胞上清液采用间接ELISA筛选，得阳性杂交瘤细胞；步骤四，亚克隆：将阳性杂交瘤细胞接入亚克隆半固体培养基中于二氧化碳培养箱培养，得单个杂交瘤细胞集落；步骤五，扩大培养：取单个杂交瘤细胞集落的细胞接入胎牛血清培养液中于二氧化碳培养箱中扩大培养，即得单克隆杂交瘤细胞。该制备方法培养周期短、成本低、筛得的阳性克隆细胞株全。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210280494.4

申请日期：2012-08-08

公开/公告号：CN102864125A

公开/公告日：2013-01-09

主分类号：C12N5/20(2006.01)I

申请/专利权人:南京巴傲得生物科技有限公司

发明/设计人:周军;王玉燕;冯展波

主申请人地址:210036 江苏省南京市栖霞区迈皋桥街道和燕路251号1幢1202房屋18室

专利代理机构:南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204

代理人:肖明芳

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种单克隆杂交瘤细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）融合：使用聚乙二醇水溶液融合骨髓瘤细胞与抗原免疫后的淋巴细胞，得融合细胞；（2）培养：将融合细胞接入HAT液体培养基中于二氧化碳培养箱中培养，得杂交瘤细胞；（3）筛选：将杂交瘤细胞上清液采用间接ELISA筛选，得阳性杂交瘤细胞；（4）亚克隆：将阳性杂交瘤细胞接入亚克隆半固体培养基中于二氧化碳培养箱培养，得单个杂交瘤细胞集落；（5）扩大培养：取单个杂交瘤细胞集落的细胞接入胎牛血清培养液中于二氧化碳培养箱中扩大培养，即得单克隆杂交瘤细胞。