一种利用黑曲霉发酵生产β-甘露聚糖酶的方法

摘要：

本发明的目的是提供一种利用黑曲霉发酵生产β-甘露聚糖酶的方法。该方法所用的黑曲霉在液体培养基中生长96小时，能够分泌表达β-甘露聚糖酶。甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃，最适pH值在2-6之间，在70℃时，保温20分钟，酶的催化活性损失不超过40％，具有较好的耐热性。在摇瓶条件下，发酵活力最高达到1200U/mL，具有用于饲料添加剂的潜在前景。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210240229.3

申请日期：2012-07-12

公开/公告号：CN103173427A

公开/公告日：2013-06-26

主分类号：C12N9/42(2006.01)I

申请/专利权人:北京伟嘉人生物技术有限公司%沈阳伟嘉牧业技术有限公司%北京伟嘉盛邦生物技术有限公司

发明/设计人:催栩;董建辉;刘玉荣;姚宏明

主申请人地址:100085 北京市海淀区上地三街嘉华大厦D-803

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种利用黑曲霉发酵生产β‑甘露聚糖酶的方法，其特征在于，所述黑曲霉发酵生产β‑甘露聚糖酶方法的步骤如下：(一)制备发酵菌种：将斜面培养的黑曲霉(Aspergillus niger)YM33182经液体菌种斜面菌种培养和一级液体培养后，得到发酵菌种；其具体过程是：1)斜面菌种：使用土豆培养基，将4℃冰箱保存的菌种划线接种到培养基上，在30‑35℃条件下，摇瓶种子培养基培养24‑72小时，待孢子长满后，用无菌冷却水洗下；2)一级液体培养：用一支斜面试管用10ml无菌水，制备孢子悬液，使得孢子含量在1×108CFU/ml以上，取1ml孢子悬液接种到250ml种子培养基中，在25‑35℃、250rpm条件下瓶培养8‑48小时，获得种子发酵液；(二)利用上述得到的菌种发酵生产β‑甘露聚糖酶：3)、利用得到的菌种发酵生产β‑甘露聚糖酶是采用液体发酵方法生产，使用的发酵培养基配方以重量份数计包括：玉米粉35‑45份、豆粕11‑14份、硫酸铵1‑2份、K2HPO4 3.5‑4.5份，魔芋粉0.5‑1.0g，溶于1000mL，蒸馏水中，调节pH值，高压灭菌。