Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用

摘要：

本发明涉及一种Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用，根据人Tβ4基因库序列设计引物，以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET-32a为模板进行PCR扩增；在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1；再以重组质粒pTXB1-Tβ4为模板，设计引物，采用两步PCR法扩增获得Tβ4-EGF融合基因；所述引物含有NdeI和XhoI酶切位点。与现有技术相比，具有以下技术效果：本发明Tβ4-EGF融合蛋白以可溶性非包涵体形式存在，经几丁质亲和层析柱纯化，纯化操作简便，表达纯度高，经Tβ4-EGF融合蛋白处理后，培养的3T3细胞增殖速度加快，增殖得到促进。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210145475.0

申请日期：2012-05-11

公开/公告号：CN103387976A

公开/公告日：2013-11-13

主分类号：C12N15/10(2006.01)I

申请/专利权人:广州市容大生物技术有限公司%深圳清华大学研究院

发明/设计人:唐旭东;赵双;杨永;宋瑜丽;谢志勇

主申请人地址:510000 广东省广州市荔湾区芳村大道东200号创意园48栋

专利代理机构:深圳市睿智专利事务所 44209

代理人:陈鸿荫%郭文姬

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种Tβ4‑EGF融合基因的制备方法，其特征在于：根据人Tβ4基因库序列设计引物，以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET‑32a为模板进行PCR扩增；在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1；再以重组质粒pTXB1‑Tβ4为模板，设计引物，采用两步PCR法扩增获得Tβ4‑EGF融合基因；所述引物含有Nde I和Xho I 酶切位点。