RecA介导的特异性目的DNA片段捕获方法

摘要：

本发明属分子生物学-生物化学技术领域，涉及在RecA的介导下特异性捕获样品中的同源目标DNA片段的方法。本发明在体外模拟RecA在体内同源重组中的作用模式，设计针对目的DNA片段的同源探针，通过RecA辅助探针和洗脱试剂，在含有RecA和ATP-γ-S的反应体系中特异性的捕获样品中的同源目标DNA片段。本方法可用于外显子或其他目的片段的捕获测序，为肿瘤和其他疾病罕见的突变位点检测提供技术改进，能避免目前外显子或其他目的片段捕获过程中探针设计需要Tm值均一性，探针杂交具有非特异性，所需样品初始量相对较大等问题。还可用于真核生物染色质状态下，基于Rad51的同源重组来捕捉体内DNA结合蛋白。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210120141.8

申请日期：2012-04-20

公开/公告号：CN103374565A

公开/公告日：2013-10-30

主分类号：C12N15/10(2006.01)I

申请/专利权人:复旦大学

发明/设计人:于文强;张如奎

主申请人地址:200433 上海市邯郸路220号

专利代理机构:上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268

代理人:吴桂琴

国别省市代码:上海;31

权利要求：

RecA介导的特异性目的DNA片段捕获方法，其特征在于，在体外模拟RecA在体内同源重组中的作用模式，设计针对目的DNA片段的同源探针，通过RecA辅助探针和洗脱试剂，在含有RecA和ATP‑γ‑S的反应体系中特异性的捕获样品中的同源目标DNA片段。