一种人脐带间充质干细胞分离培养方法

摘要：

本发明提供了一种人脐带间充质干细胞分离培养方法，包括以下步骤：取足月剖宫产胎儿脐带，无菌条件下用PBS冲洗，去除血迹；在动物细胞培养基中用无菌剪刀将洗净的脐带剪成组织块，去除其血管并弄碎，然后与动物细胞培养基充分混合振荡后离心，将离心所得的沉淀与MesenCult-XF完全培养基混合震荡均匀种植于细胞培养皿中，置于37℃，5％CO2培养箱中培养；培养第5天，将组织块全部吸出弃去，补加MesenCult-XF完全培养基，之后每隔3天更换培养基继续培养，获得脐带间充质干细胞。本发明不使用动物血清，操作简单，重复性好，安全性高，所获细胞经多次传代后稳定。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110261543.5

申请日期：2011-08-30

公开/公告号：CN102965336A

公开/公告日：2013-03-13

主分类号：C12N5/0775(2010.01)I

申请/专利权人:姚惟琦%武栋成%武汉康苑生物医药科技有限公司

发明/设计人:姚惟琦;武栋成

主申请人地址:430071 湖北省武汉市东湖路185号武汉大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

一种人脐带间充质干细胞分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取足月剖宫产胎儿脐带，无菌条件下用PBS冲洗，去除残留血迹；(2)在动物细胞培养基中用无菌剪刀将步骤(1)中洗净的脐带剪成组织块，去除组织块的血管并将组织块弄碎；(3)将步骤(2)中弄碎的组织块置于离心管中与动物细胞培养基充分混合振荡后离心，离心机速度为1600～2200转/分钟，离心5～10分钟弃去上清，重复2～4遍；(4)将离心沉淀部分与配置好的MesenCult‑XF完全培养基混合震荡均匀种植于细胞培养皿中，并置于37℃，5％CO2培养箱中培养；(5)培养第5天，将组织块全部吸出弃去，补加MesenCult‑XF完全培养基，且显微镜下观察到贴壁的梭形或多边形的细胞，之后每隔3天更换一次培养基，继续培养。