FXYD6胞内区蛋白的表达和纯化方法

摘要：

本发明公开了一种FXYD6胞内区蛋白的表达和纯化的方法，是采用核苷酸序列如SEQ ID No：2和SEQ ID No：3所示的引物对、利用PCR技术扩增FXYD6胞内区序列后，将扩增出的FXYD6胞内区序列插入到表达载体pGEX-6P-1中，构建重组载体pGEX-6P-1-FXYD6胞内区；再将重组载体转化于宿主细胞中，并在宿主细胞中表达FXYD6胞内区重组蛋白；表达的重组蛋白进行鉴定后，通过亲和层析柱进行纯化，经过纯化的蛋白再通过SDS-PAGE分析鉴定纯度。本发明提供了FXYD6胞内区的纯化蛋白，进一步可应用于制备FXYD6蛋白胞内区的单克隆抗体。为进一步研究FXYD6组织分布提供了有利工具。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110259079.6

申请日期：2011-09-02

公开/公告号：CN102978210A

公开/公告日：2013-03-20

主分类号：C12N15/12(2006.01)I

申请/专利权人:周宁新

发明/设计人:周宁新

主申请人地址:100088 北京市西城区新街口外大街16号

专利代理机构:北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100

代理人:王淳

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种FXYD6胞内区蛋白的表达和纯化的方法，其特征在于，步骤如下：a.采用核苷酸序列如SEQ ID No：2和SEQ ID No：3所示的引物对，利用PCR技术扩增FXYD6胞内区基因；b.将扩增出的FXYD6胞内区基因插入到已用BamH I和Xho I双酶切后的表达载体pGEX‑6P‑1中，构建重组载体pGEX‑6P‑1‑FXYD6胞内区；c.将重组载体pGEX‑6P‑1‑FXYD6胞内区转化于宿主细胞中，并在宿主细胞中表达FXYD6胞内区蛋白；d.表达的FXYD6胞内区蛋白采用蛋白质免疫印记进行鉴定，之后通过亲和层析柱进行纯化，经过纯化的蛋白再通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鉴定纯度。