一种剑麻超氧化物歧化酶的分离方法
一种剑麻超氧化物歧化酶的分离方法,是以剑麻叶片为材料,经过清洗、匀浆、过滤、离心、丙酮沉淀,沉淀用磷酸盐缓冲溶液溶解,离心,所得上清液经透析、浓缩,得到浓缩液。该浓缩液经过葡聚糖凝胶过滤,收集活性峰洗脱液,离心,得到上清液为超氧化物歧化酶液,本发明方法简便快速安全价廉,适合推广。
发明专利
CN201110223401.X
2011-08-05
CN102911921A
2013-02-06
C12N9/08(2006.01)I
湛江师范学院
陈冰
524048 广东省湛江市赤坎区寸金路29号
北京神州华茂知识产权代理有限公司 11358
吴照幸
广东;44
一种剑麻超氧化物歧化酶的分离方法,其特征在于,包括下述步骤:(1)取新鲜成熟健康的剑麻叶片,洗净、晾干、切碎,按质量体积比1∶2~3的比例加入pH为7~8,浓度为0.01~0.09mol/L的磷酸盐缓冲溶液,经匀浆、过滤、离心,收集上清液;(2)取步骤(1)所得上清液加入丙酮,静置3~4小时,离心,收集沉淀;用浓度为0.001~0.005mol/L磷酸盐缓冲溶液溶解所得沉淀,离心,得上清液;上清液在浓度为0.001~0.005mol/L磷酸盐缓冲溶液中透析得透析液;将透析液离心,收集上清液,经浓缩,收集浓缩液;(3)取步骤(2)所得浓缩液用葡聚糖凝胶过滤,用pH为7~8,浓度为0.001~0.005mol/L的磷酸盐缓冲溶液进行洗脱,收集洗脱液,经离心,得上清液,经浓缩,得超氧化物歧化酶液,冷藏或冷冻干燥得超氧化物歧化酶。