一种亲本特异位点测序克隆基因的方法

摘要：

本发明公开了一种亲本特异位点测序克隆基因的方法。其包括以下步骤：选用目标性状有差异的材料做亲本，通过两亲本杂交构建分离群体，从分离群体中选择具有隐性性状的个体构建隐性基因池；对两个亲本进行基因组高通量测序，通过初步直接组装并比对，获得显性与隐性亲本特异位点，该特异位点为目标基因的候选位点；通过富集隐性池候选位点并重测序或PCR方式逐个检查隐性池每个个体的每个候选位点的方式，确定目标基因位点；通过PCR扩增克隆全长目标基因，通过遗传互补实验验证目标基因。本发明以测序为基础，可用于任何物种，直接克隆基因本身。采用本发明的方法，工作量大为减少，速度大为加快，而且降低了风险。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110215778.0

申请日期：2011-07-29

公开/公告号：CN102899312A

公开/公告日：2013-01-30

主分类号：C12N15/10(2006.01)I

申请/专利权人:江汉大学

发明/设计人:彭海;张静;章伟雄

主申请人地址:430056 湖北省武汉市沌口经济技术开发区新江大路8号江汉大学

专利代理机构:北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138

代理人:孟阿妮

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

一种亲本特异位点测序克隆基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：选用目标性状有差异的材料做亲本，通过两亲本杂交构建分离群体，从分离群体中选择具有隐性性状的个体构建隐性基因池；对两个亲本进行基因组高通量测序，通过初步直接组装并比对，获得显性与隐性亲本特异位点，该特异位点为目标基因的候选位点；通过富集隐性池候选位点并重测序或PCR方式逐个检查隐性池每个个体的每个候选位点的方式，确定目标基因位点；通过PCR扩增克隆全长目标基因，通过遗传互补实验验证目标基因。